凝胶成像锌染色原理


凝胶成像锌染色原理

文章插图
1、凝胶电泳:首先,待分析的蛋白质样品经过SDS-PAGE凝胶电泳分离 。SDS-PAGE通过在蛋白质样品中加入类似于十六烷基硫酸钠(SDS)的表面活性剂,使蛋白质带有负电荷,并通过电场作用分离成不同大小的带状物 。
2、转移:凝胶电泳完成后,蛋白质通过电泳转移到含有锌离子的转移缓冲液中 , 这个步骤称为电泳转移 。
3、锌染色:在转移缓冲液中加入适量的亚硫酸和硫代硫酸钠,这两种试剂会与锌离子形成由蛋白质分子铁氰化合物组成的沉淀,这称为锌染色 。这个沉淀表现为紫蓝色 。
【凝胶成像锌染色原理】4、可视化:经锌染色处理后 , 可以直接观察到电泳凝胶上的蛋白质带状区域(通常出现紫蓝色的带状区域),这些区域对应着各个分子量的蛋白质 。